جداسازی و کلون کردن بخشی از ژن cl9p4 شتر بومی منطقه و انتقال به e.coli به منظور تولید واکسن سبز

در سال های اخیر، با پیشرفت زیست شناسی مولکولی و بیوتکنولوژی، تحقیق در زمینه واکسن های گیاهی به موضوعی بسیار مهم تبدیل شده است. مزایای زیادی برای تولید واکسن در گیاهان تراریخته مطرح شده است که از آن جمله می توان به هزینه پایین تولید، سهولت نگهداری، عدم انتقال آلودگی و سازگاری بالا با سیستم ایمنی بدن اشاره نمود. با توجه به کاربرد های گسترده تشخیصی و درمانی آنتی بادی های مونوکلونال، تولید آنها از منابع دائمی، ایمن و ارزان حائز اهمیت می باشد. طیف وسیعی از این مولکولها، شامل آنزیم ها به منظور پیش دارو درمانی، توکسین ها برای درمان سرطان، ویروس ها برای ژن درمانی، لیپوزوم ها برای دارو رسانی هدفمند و حسگرها برای تشخیص با قطعیت بیشترتولید شده است. با توجه به در دست نبودن اطلاعاتی در مورد وجود داشتن ژن تولید کننده آنتی بادی مونوکلونال در شتر بومی منطقه ،همچنین پتانسیل موجود در منطقه و کاربردهای تشخیصی و درمانی ژن cl9p4 در انواع سرطان ها این پژوهش با هدف جدا سازی و کلون نمودن ژن cl9p4 شتر بومی منطقه در باکتری e.coli به منظور بررسی و فراهم نمودن بستری مناسب برای مطالعاتی جدید جهت تولید واکسن های سبز انجام شد. پس از تهیه نمونه و استخراج dna ژنومی از خون شتر، طراحی پرایمر انجام و ژن cl9p4 تکثیر و جهت تعیین توالی ارسال گردید. با الایمنت نمودن نتایج حاصل از سکونسینگ با دیگر توالی های موجود در ncbi از صحت قطعه تکثیر شده اطمینان حاصل گردید. سپس ژن cl9p4 طی مراحل لایگیشن و ترانسفورماسیون در باکتری e.coli کلون شد. استخراج پلاسمید انجام و هضم آنزیمی با آنزیم bam hi صورت پذیرفت. نتایج این تحقیق نشان داد ژن cl9p4 در شتر بومی منطقه موجود و امکان کلون نمودن آن در باکتری e.coli وجود دارد.